產(chǎn)生皺紋是皮膚衰老的特征之一。研究表明，人們提出了很多衰老學(xué)說(shuō)，其中活性氧自由基學(xué)說(shuō)是較多支持的學(xué)說(shuō)。
人體正常生理代謝和環(huán)境影響，如紫外線照射、環(huán)境污染等，都會(huì)導(dǎo)致活性氧（ROS）的產(chǎn)生，過(guò)量的自由基會(huì)導(dǎo)致皮膚衰老等問(wèn)題產(chǎn)生。減少自由基的產(chǎn)生和清除老化代謝物是減緩皮膚衰老以及皺紋產(chǎn)生的方法之一
化妝品抗皺功效測(cè)試方法分為人體法和體外法兩大類，而體外法有生物化學(xué)法、細(xì)胞法、表皮模型法、斑馬魚(yú)胚胎法等。其中生物化學(xué)法使用相對(duì)便捷、成本低、易于實(shí)現(xiàn)、速度快，可用于抗皺原料的高通量篩選。如DPPH自由基清除法、ABTS自由基清除法、超氧陰離子自由基清除法等。
一、DPPH自由基清除法
DPPH乙醇溶液呈紫紅色，在519 nm處有最大吸收波長(zhǎng)。當(dāng)加入自由基清除劑時(shí)，DPPH自由基被清除，溶液逐漸變淺，在519 nm 處的吸光度隨之減小。溶液顏色越淺，其吸光度值越低，自由基清除劑清除DPPH自由基的效果越好。
二、ABTS自由基清除法
ABTS與過(guò)硫酸鉀反應(yīng)生成綠色的ABTS+。具有抗氧化性的物質(zhì)可抑制ABTS+的生成，ABTS+在可見(jiàn)光區(qū)最大吸收峰734 nm處，測(cè)定吸光度，其光度值的大小可定量得出反應(yīng)物質(zhì)的自由基清除能力。即其吸光度值越低，具有抗氧化性的物質(zhì)清除ABTS自由基的能力越強(qiáng)。
三、超氧陰離子自由基清除法
鄰苯三酚在堿性條件下能迅速發(fā)生氧化鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，釋放出超氧陰離子自由基（O2—），O2—進(jìn)一步加速鄰苯三酚的氧化，生成在320 nm 處有特殊吸收的中間產(chǎn)物。若在反應(yīng)體系中加入抗氧化物，可清除O2—，阻止中間產(chǎn)物的積累，使得在320 nm處的吸光度減小。
四、羥自由基清除法
水楊酸與羥自由基（·OH）反應(yīng)生成可 2,3- 二羥基苯甲酸，它在 510 nm處有最大吸收波長(zhǎng)。利用過(guò)氧化氫（H2O2）與七水硫酸亞鐵（FeSO4·7H2O反應(yīng)生成·OH，加入具有清除自由基能力的物質(zhì)，可抑制2,3-二羥基苯甲酸生成，降低 510 nm 處的吸光度。
自由基清除劑或抗氧化劑可以提供電子、抑制氧化。通過(guò)吸收自由基的同時(shí)，細(xì)胞不受攻擊，達(dá)到清除自由基目的，減少皺紋的產(chǎn)生，從而達(dá)到減緩皮膚的衰老過(guò)程，化妝品的成品、半成品和原料可以通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定其是否具有清除自由基的能力及其能力的強(qiáng)弱。
以上幾種方法可以計(jì)算樣品清除自由基的清除率，以及計(jì)算其半數(shù)清除濃度（IC50）。通過(guò)進(jìn)行不同樣品的自由基清除能力比較可知，IC50值越小，代表該樣品的清除自由基能力越強(qiáng)，從而比對(duì)出不同化妝品成品、半成品或原料清除自由基的能力。
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